消毒 杀菌 霉菌污染 芽孢污染 无菌操作 杀孢子剂
摘要：
食品化验室及第三方检测机构实验室无菌室的灭菌是进行微生物实验的关键，无菌状态直接影响了产品的微生物结果，无菌室的杀菌消毒变的更为重要。微生物实验室较为顽固的微生物主要集中在霉菌，霉菌污染可能会出现在培养箱中，或者配药室，或者无菌室，如何防控霉菌污染，无菌室的空气质量如何检查，如何保障，本文将重点讲解
一，无菌室（洁净区）:
无菌室是微生物检测人员进行微生物实验的关键地方，无菌室的洁净度直接决定了实验室的微生物结果的可信度。
1.1 无菌室空气洁净度：
无菌操作间应满足相应洁净级别的操作环境，其环境应符合万级洁净度要求。具体来说，每立方米直径大于等于0.5微米的尘埃粒子数应小于等于350000个。
操作区域如超净工作台、生物安全柜里需要达到洁净度100级，即“整体万级，局部百级”。这意味着在百级洁净度区域内，静态检测自然沉降菌应小于等于1CFU/皿。
1.2 空气流动与压力控制：
无菌操作间应根据检验品种的需要，保持对邻室的相对正压或相对负压，以防止外界污染空气的流入。
定期检测洁净度，确保空气质量的稳定。对于做医药的企业，日常洁净区的万级和百级区域的浮游菌需要月检测一次。
1.3 温湿度控制：
无菌室需要保持稳定的温湿度，一般要求温度在20-25℃之间，湿度在50%-55%之间，以确保微生物实验的稳定性和可靠性。
二，实验室霉菌污染
夏季雨季微生物实验室霉菌污染的原因深度分析
夏季雨季，高温高湿的环境为微生物的生长和繁殖提供了极为有利的条件，尤其是对于霉菌这类能在潮湿环境中迅速繁衍的微生物来说，更是如鱼得水。在微生物实验室中，这种环境更是加剧了霉菌污染的风险。
2.1 外部环境因素
高温高湿：夏季雨季气温高、湿度大，为霉菌的生长提供了理想的条件。实验室如果缺乏有效的空气净化系统和湿度控制设备，就更容易受到霉菌的侵扰。
气流传播：霉菌孢子具有很强的抗逆性，能在空气中长时间保持休眠状态，并随气流进行远距离传播：在雨季，气流携带的水分和尘埃为霉菌孢子的传播提供了便利。
2.2 实验室内部因素
培养箱污染：很多实验室在培养霉菌时采用的霉菌培养箱，培养箱内部存在大量的霉菌孢子。这些孢子会通过平皿的缝隙或冷凝水滴落到培养基上，导致污染。
设备与仪器污染：实验室中的平台秤、离心机、移液器等设备如果不经常进行清洗和消毒，就会成为霉菌滋生的温床。这些设备在使用过程中，很容易将霉菌孢子带入实验环境中。
人员操作污染：实验室人员如果操作不规范、不注意个人卫生和实验室卫生，就会成为霉菌污染的重要来源。例如，实验人员的手部、衣物等可能携带霉菌孢子，进而污染实验环境。
2.3 管理因素
实验室管理不规范：如果实验室没有建立完善的清洁和消毒制度，或者制度执行不严格，就会导致霉菌污染的风险增加。
监测和防控措施不到位：实验室如果没有有效的霉菌监测和防控措施，就无法及时发现和处理霉菌污染问题，导致污染问题持续存在。
三，如何判断无菌室微生物不合格，如何判断被霉菌污染了？
1、检测的产品超标严重，排除了车间的原因，应该自查实验室环境如培养箱、无菌室是否存在微生物污染，实验室的大环境微生物超标，导致检测环境微生物不符合要求，进而影响了检测结果的准确性。
2、无菌室日常检测的比对样品空白样品的沉降法测得菌落总数结果超标，即无菌室的环境微生物不符合要求，影响了产品的微生物结果。
3、无菌室的日常消毒不到位，采用紫外线消毒后无菌室未达到无菌状态。
4、无菌室空气沉降法采用孟加拉红琼脂平板，培养后发现琼脂长霉菌判定为霉菌污染。
四，无菌室空气质量检查
无菌室空气质量的检查可以参考GB/T 16293 《医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》和GB/T 25915.7《洁净室及相关受控环境 第7部分：隔离装置(洁净风罩、手套箱、隔离器、微环境)》。
3.1 沉降法
面积小于30m2的室内设一条对角线取3点，在其中心以及两端距墙1m处各取1点；面积大于30m2的室内房间四面距墙1m和中央各放置一个平皿，高度为实验台高度。培养基平皿开盖暴露10min，然后盖上盖子倒放，培养48h，计数每个平皿上的菌落数。
日常监控时，可以设定可接受的菌落数限值。一般无菌室所有的取样平皿上的细菌总数应小于15个。空气质量良好的无菌室，通常么个平皿上生长的细菌不超过2个。
3.2 空气过滤法：
空气采样除了自然沉降法外，还可以使用专门的主动式采样器。主动式采样器可以评估风险区空气微生物的特征。主动式采样器主要包括过滤采样器、撞击采样器、冲击采样器等。
五，实验室无菌室霉菌防控误区，实验室霉菌超标排查原因方法及消毒方案
4.1 紫外线杀菌
误区：无菌室杀菌仅依赖紫外线
事实：紫外线对物体的穿透能力很弱，这限制了其在一些物体内部或密集物质中的杀菌效果。例如，对于液体或固体内部的微生物，紫外线可能无法完全穿透并达到杀菌效果。紫外线的波长在200~300nm时有杀菌能力，这个波长范围低于可见光谱，因此其穿透能力相对较弱。
4.2 过度依赖常规化学消毒剂：
误区：虽然消毒剂可以有效抑制或杀灭大部分细菌和病毒，但实验室往往认为普通消毒剂同样对霉菌有良好效果。
事实：霉菌具有强大的生命力和适应能力，一般的消毒剂很难将其彻底杀灭。因此，过度依赖化学消毒剂可能导致霉菌防控效果不佳。需要更高效的消毒剂。
4.3 忽视人员培训和管理：
误区：实验室在霉菌防控过程中，往往忽视了人员培训和管理的重要性。
事实：实验室人员的培训和管理对于霉菌防控至关重要。未经专业培训的人员可能对霉菌防控知识了解不足，而管理不善则可能导致防控措施无法得到有效执行。
实验室霉菌超标原因排查：
1、培养箱是否被污染了，可以用正常的未长菌的空白PCA平板（或孟加拉红平板）开盖放到培养箱中，就是利用空气沉降方法测菌，开盖10-20分钟后盖盖，然后培养看是否长菌。
2、无菌室是否被污染了，还是利用空气沉降法，采用空白未长菌的PCA平板测试
3、倾注的PCA培养基是否灭菌合格了，这个可以直接采用PCA倾注灭菌后的平皿看长菌情况
4、实验室空间环境被污染，也是利用空气沉降法测菌排查
排查后对于关键环节消毒，实在没有排查到建议对整个实验室空气物表等彻底消毒。
消毒方案：
奥克泰士作为一款高效的消毒剂，其的复合过氧化氢银离子技术，对细菌、酵母菌、真菌和孢子等微生物具有的杀灭效果。以下是在实验室洁净区使用奥克泰士的详细方案。
1）使用前准备
确定洁净区的范围和需要消毒的物体表面。
准备好所需的奥克泰士消毒剂、喷雾器、清洁布等。
确保洁净区内的人员已经穿好实验服，佩戴好手套和护目镜等防护设备。
2）消毒步骤
初步清洁：使用清洁布和清水对洁净区的物体表面进行初步清洁，去除表面的污垢和残留物。
配制奥克泰士消毒剂：根据洁净区的面积和需要消毒的物体表面数量，按照奥克泰士的使用说明，配制适当浓度的消毒剂。
喷洒消毒：使用喷雾器将奥克泰士消毒剂均匀地喷洒在洁净区的物体表面，确保每个角落都被覆盖到。
等待与干燥：根据奥克泰士的使用说明，等待一段时间让消毒剂充分发挥作用，然后使用清洁布擦拭表面，让其自然干燥。
六，奥克泰士杀孢子剂应用于实验室消毒，保障无菌环境
6.1 奥克泰士Oxytech的杀菌效力和品质经过众多机构、研究所、行业协会等超过300多个测试、验证，通过了德国与欧盟多项权威和苛刻的检测认证。
6.2 资质： IFS食品标准认证；EMAS欧盟生态审核认证；德国技术监督协会—DIN EN ISO 9001；德国技术监督协会—DIN EN ISO14001；欧盟A.I.S.E.认证；德国GfPS实验室检测验证。
6.3 为了保证无菌室的无菌状态使用前每次都要杀菌，无菌室一般采用紫外灯消毒物体表面，但是无菌室的边角处有些是无法消杀彻底的，边角处的消毒建议使用食品级的杀菌剂。普通消毒剂因为气味刺激，腐蚀性严重，会影响微生物的培养结果，奥克泰士消毒剂是食品级消毒剂，无色无味基本无腐蚀，主要成分是过氧化氢-银离子复合型，消毒作 用后分解为水和氧气。保证了微生物的结果真实可信。
6.4 奥克泰士作为高效型消毒剂，对霉菌的杀灭率高达99.999%，可以高效杀灭霉菌、孢子、芽孢及实验室噬菌体污染
奥克泰士作为一种高效、安全、环保的消毒剂，在实验室霉菌防控中发挥着重要作用。通过定期清洁、预防性消毒和应急处理等措施，可以有效降低实验室霉菌污染的风险，保障实验结果的准确性和实验人员的健康。
